岩白菜ISSR-PCR反应体系的优化

作     者：刘芸君 王仕玉 郭凤根 刘云芬 杨正安 张应华 LIU Yun-jun;WANG Shi-yu;GUO Feng-gen;LIU Yun-fen;YANG Zheng-an;ZHANG Ying-hua

作者机构：云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201 云南农业大学园林园艺学院云南昆明650201 

基　　金：云南省自然科学基金项目(No.2007C211M "云南岩白菜的遗传多样性及其主要药用成份的研究")资助~~ 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2012年第22卷第1期

页      码：52-55页

摘      要：目的:优化岩白菜ISSR-PCR反应体系,为利用ISSR标记进行岩白菜遗传多样性研究服务。方法:采用5因子4水平正交设计法优化岩白菜ISSR-PCR反应体系。结果:五个因子从大到小的影响力排序结果为:dNTPs>Mg2+>模板DNA>引物=Taq酶。岩白菜ISSR-PCR最佳反应体系为:总体积25μL,内含10×PCR缓冲液2.5μL、2.5 mmol.L-1Mg2+、2.0 U Taq酶、0.2 mmol.L-1dNTPs、0.48μmol.L-1ISSR引物、125 ng模板DNA。结论:研究获得的最佳反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,为利用ISSR标记技术研究岩白菜遗传多样性奠定了基础。

主 题 词：岩白菜 ISSR-PCR反应体系 优化 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-311X.2012.01.015

馆 藏 号：203865084...