牛乳中产气荚膜梭菌α毒素和金黄色葡萄球菌肠毒素A的双重PCR检测法

作     者：张曼 王晶钰 ZHANG Man;WANG Jingyu

作者机构：西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 杨凌职业技术学院动物工程系陕西杨凌712100 

基　　金：国家"十一五"科技支撑计划奶业专项(2006BAD4A11) 陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项(2008ZDKG-05) 

出 版 物：《西北农业学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Occidentalis Sinica)

年 卷 期：2010年第19卷第9期

页      码：29-33页

摘      要：建立牛奶乳样中产气荚膜梭菌α毒素和金黄色葡萄球菌肠毒素A的双重PCR检测方法。根据产气荚膜梭菌α毒素和金黄色葡萄球菌肠毒素A基因序列分别设计了2对特异性引物,分别从产气荚膜梭菌和金黄色葡萄球菌参考菌株的肉汤培养物中提取DNA,进行PCR扩增,并进行特异性、敏感性试验和临床样品检测。经过PCR反应条件的优化,建立了产气荚膜梭菌α毒素和金黄色葡萄球菌肠毒素A的双重PCR检测方法,均扩出了相应的目的条带。该方法将参考菌株的肉汤培养物稀释1 000倍后仍可扩出目的条带,且对大肠埃希菌等的PCR检测为阴性。对临床采集的50份乳品样本分别用细菌分离培养法和PCR方法进行检测,两种方法的符合率达90%以上,但双重PCR检测方法具有特异性强和敏感性高的特点。

主 题 词：产气荚膜梭菌 α毒素 金黄色葡萄球菌 肠毒素A PCR检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-1389.2010.09.007

馆 藏 号：203865363...