小反刍兽疫病毒H基因的真核表达

作     者：阮洋 秦峻岭 高玉伟 黄海楠 孙玮 杨松涛 王承宇 王铁成 黄耕 王志亮 夏咸柱 

作者机构：吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室 吉林大学畜牧兽医学院 中国动物卫生与流行病学中心 国家外来动物疫病诊断中心 

基　　金：公益性行业科研专项资助项目(No.200903037) 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2011年第6卷第2期

页      码：97-100,F0003页

摘      要：目的构建小反刍兽疫病毒(PPRV)H基因真核表达载体,并对其表达能力及免疫活性进行鉴定,为后期疫苗的研制提供基础。方法根据GenBank上公布的PPRV(China/Tib/Gej/07-30株)H基因的序列进行引物设计并进行扩增,纯化回收后将其克隆到pMD-18T载体中,将测序鉴定正确的目的基因克隆到真核表达载体pCAGGS上。结果成功构建了含有PPRV H基因的真核表达载体pCAGGS-H。通过脂质体介导质粒pCAGGS-H转染DK细胞,经间接免疫荧光及Western blot证实,表达蛋白分子质量单位为68.8 ku,能与PPRV阳性血清发生特异性反应。结论 pCAGGS-H在真核细胞内可有效表达。

主 题 词：小反刍兽疫 H基因 pCAGGS真核表达载体 转染 Western blot 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13350/j.cjpb.2011.02.002

馆 藏 号：203866050...