Epstein-Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建
作者机构：中山医科大学附属第三医院耳鼻咽喉科广东广州510630 中山医科大学附属第三医院传染病科广东广州510630
基 金：广东省自然科学基金!(A19970 0 78) 广东省医学科学技术研究基金!(A199716 9)
出 版 物：《中山医科大学学报》 (Academic Journal of Sun Yat-sen University of Medical Sciences)
年 卷 期：2000年第21卷第6期
页 码：445-447页
摘 要：【目的】扩增Epstein Barr病毒 (EBV)DNA多聚酶基因 ,构建高效表达载体。【方法】根据EBV全基因序列 ,在EBVDNA多聚酶基因的 3′、5′端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物 ,以B95 8细胞DNA为模板 ,采用改良PCR方法扩增出EBVDNA多聚酶基因 (3 0 44bp)。用EcoRⅠ和HindⅢ酶切该基因片断并克隆至表达载体 pMAL p2 ,采用蓝白斑试验筛选阳性菌落。EcoRⅠ和HindⅢ酶切分析、鉴定重组体 pEBP。【结果】通过电泳鉴定 ,PCR产物为 3 0 44bp ,与EBVDNA多聚酶基因大小一致。经蓝白斑试验及限制性DNA内切酶分析 ,成功地筛选到EBVDNA多聚酶基因重组表达质粒 pEBP。【结论】本实验成功地扩增出完整EBVDNA多聚酶基因 ,并构建了高效表达重组体 ,为进一步在体外表达、制备EBVDNA多聚酶蛋白奠定了基础。
主 题 词：爱泼期坦-巴尔病毒 RCR DNA 载体 鼻咽癌 诊断
学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 100214[100214] 10[医学]
核心收录：
D O I：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2000.0164
馆 藏 号：203866160...
