牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中的优化表达

作     者：曾范利 张云 张梦 时坤 李建明 刘菲 李晶 杜锐 

作者机构：吉林农业大学中药材学院长春130118 吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 长春金赛药业有限责任公司长春130012 吉林农业大学研究生学院 教育部动物生产及产品质量安全重点实验室吉林省药用动物二级实验室长春130118 

基　　金：国家科技支撑计划(2011BA103B02-1) 国家自然科学基金(31072140 31272565) 吉林省科技厅科技支撑计划(20120225) 吉林农业大学博士启动基金(201209) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2014年第45卷第1期

页      码：94-100页

摘      要：为构建牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)基因工程活载体疫苗,根据已知的BVDV Changehun184毒株E2基因序列,利用***生物学软件对其进行分析,预测了可能存在的抗原表位,设计6对引物,分别扩增了包含预测抗原位点的6个片段,1—297 aa、1—345 aa、1—374 aa、45—297 aa、45—345 aa和45—374 aa,克隆至穿梭表达载体pMV361中,经酶切、PCR扩增和测序证实已正确插入到表达载体中,构建了6个原核表达质粒。阳性重组质粒通过电转化到卡介苗(BCG)感受态中,热诱导后,进行SDS-PAGE分析和免疫印迹检测。结果表明6个重组质粒在卡介苗中均有不同程度的表达,表达产物与理论推测的相对分子质量一致。Western blot结果显示其融合蛋白能被牛抗BVDV的阳性血清识别,具有相应的反应原性。本研究为进一步研究BVDV基因工程活载体疫苗奠定了基础。

主 题 词：牛病毒性腹泻-黏膜病病毒 E₂基因 卡介苗 优化表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2014.01.013

馆 藏 号：203869668...