钩端螺旋体OmpL1抗原表位预测、克隆和表达

作     者：杨榆玲 褚嘉祐 郭晓奎 石铁流 黄小琴 俞建昆 

作者机构：中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650118 上海第二医科大学病原生物学教研室上海200025 中科院上海生命科学信息中心上海200032 

基　　金：国家高技术研究发展计划 [2 0 0 3AA2 2 3 0 3 1] 国家自然科学基金(3 0 3 70 0 71和 3 0 3 0 0 197) 

出 版 物：《中国人兽共患病杂志》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2005年第21卷第1期

页      码：27-31页

摘      要：目的　应用生物信息学方法预测钩体外膜蛋白OmpL1的表位 ,结合基因工程手段进行表位重组、表达和分离纯化。方法　用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测OmpL1的表位 ,PCR合成重组表位基因片段 ,克隆PCR产物构建表达质粒 pGEX/Omp Omp ,测序验证。对含有该质粒的大肠杆菌BL2 1(DE3)进行诱导表达 ,表达产物westernblot分析并纯化融合蛋白。结果　预测到 2个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。重组表位基因序列与理论设计完全一致。IPTG诱导BL2 1(DE3)中高效表达Mr约 30 0 0 0的融合蛋白 ,纯化后蛋白纯度 >90 %。结论　成功构建原核表达质粒pGEX/Omp Omp ,并进行含重组表位的GST融合蛋白的分离纯化 ,为OmpL1的表位研究和应用于亚单位疫苗奠定了基础。

主 题 词：OmpL1 抗原表位 钩端螺旋体 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2005.01.008

馆 藏 号：203870055...