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短发卡样RNA抑制c-myc癌基因在乳腺癌细胞中的过度表达

短发卡样RNA抑制c-myc癌基因在乳腺癌细胞中的过度表达

作     者:翟荣林 王国斌 Zhai Ronglin;Wang Guobin

作者机构:华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科 

基  金:国家863计划资助课题(No.2001AA218051) 

出 版 物:《华中医学杂志》 (Central China Medical Journal)

年 卷 期:2005年第29卷第3期

页      码:187-189页

摘      要:目的构建人cmyc癌基因特异性短发卡样RNA(shRNA)真核表达载体,抑制靶基因cmyc在乳腺癌细胞中的过度表达。方法设计有小发夹结构的三条寡核苷酸序列,克隆至空载体pEGFPC1/U6中构建重组体并体外转染乳腺癌细胞株MCF7,48h后分别用RTPCR和Westernblot方法检测胞内cmyc癌基因mRNA水平和蛋白水平。结果①成功构建shRNA真核表达载体;②shRNA表达载体转染MCF7细胞48h后,pEGFPC1/U62能明显下调胞内cmycmRNA水平和蛋白水平(P<0.01)。结论构建的shRNA真核表达载体能显著抑制cmyc癌基因在MCF7细胞中的过表达。

主 题 词:c-myc癌基因 过度表达 抑制 乳腺癌细胞株MCF-7 pEGFP-C1 MCF-7细胞 真核表达载体 mRNA水平 Western RNA真核表达 shRNA RT-PCR 蛋白水平 基因特异性 核苷酸序列 方法设计 体外转染 blot 靶基因 重组体 过表达 胞内 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号:203870266...

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