应用降落PCR及克隆测序检测2型糖尿病外周血白细胞胰岛素样生长因子受体IGF1R基因甲基化

作     者：陈玲 严世荣 胡培 陈永梅 程龙海 CHEN Ling;YAN Shi-rong;HU Pei;CHEN Yong-mei;CHENG Long-hai

作者机构：武汉大学第二临床医学院临床检验诊断学湖北武汉443700 湖北医药学院附属人民医院检验科 湖北医药学院附属太和医院检验科湖北十堰442000 

基　　金：湖北医药学院博士启动金(2010QDJ22) 

出 版 物：《湖北医药学院学报》 (Journal of Hubei University of Medicine)

年 卷 期：2011年第30卷第6期

页      码：557-560页

摘      要：目的:比较应用降落PCR(TD-PCR)及克隆测序检测2型糖尿病患者外周血白细胞中胰岛素样生长因子受体(IGF1R)基因启动子区DNA甲基化位点的方法。方法:提取2型糖尿病患者外周血白细胞DNA进行亚硫酸氢盐处理,设计引物扩增IGF1R基因启动子区富含CG位点序列,分别行普通PCR和TD-PCR扩增,对含目的条带产物进行直接测序和克隆后测序。结果:与普通PCR扩增结果相比,TD-PCR扩增条带清晰、产物量多、二聚体少;且TD-PCR减少了对退火温度不断摸索的过程。克隆后测序峰图清晰,碱基丢失错判频率减少。结论:推荐应用TD-PCR检测亚硫酸氢盐处理的DNA甲基化位点,并进行克隆后测序。

主 题 词：甲基化 降落PCR 胰岛素样生长因子1受体 2型糖尿病 测序 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

馆 藏 号：203870378...