猪圆环病毒2型Cap蛋白的可溶性表达、纯化及鉴定

作     者：孙伟 范红结 徐正军 高升 

作者机构：江苏省动物疫病预防控制中心江苏南京210036 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第45卷第3期

页      码：66-69页

摘      要：为获得可用于猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测的重组抗原Cap蛋白,根据GenBank中发表的PCV2 ORF2序列设计物,以PCV2 JS株基因组为模板,PCR扩增出无核定位信号(nuclear localization signal,NLS)的ORF2基因片段,插入质粒pET-30a(+)构建重组表达质粒pET-ORF2ΔNLS,IPTG可诱导该重组菌表达约27 ku大小的重组蛋白。进一步分析发现该蛋白在大肠杆菌中主要以可溶性形式存在;镍柱亲和层析法纯化该蛋白,用PCV2阳性血清进行免疫印迹试验,结果发现纯化的重组蛋白能与PCV2抗体发生特异性反应,表明该纯化的蛋白具有很好的免疫反应原性,可用于临床样本中PCV2抗体的检测。

主 题 词：猪圆环病毒2型 Cap蛋白 表达 纯化 鉴定 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203873360...