肠球菌SYBR Green I实时定量PCR检测方法的建立及应用

作     者：宋月 崔敏 王超群 付彤 韩立强 魏战勇 王亚宾 SONG Yue;CUI Min;WANG Chao-qun;FU Tong;HAN Li-qiang;WEI Zhan-yong;WANG Ya-bin

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 北京汉业先科科技有限公司北京101500 漯河出入境检验检疫局河南漯河462000 

基　　金：国家重大星火计划项目(2001GA750001) 河南省重大科技专项(111100110300) 

出 版 物：《河南农业大学学报》 (Journal of Henan Agricultural University)

年 卷 期：2014年第48卷第3期

页      码：315-319页

摘      要：为了建立肠球菌的实时定量PCR检测方法,以便更加快捷、准确检测肠球菌.根据肠球菌16S rDNA高度保守的特性,在保守区设计1对引物,对其扩增条件进行探索,建立荧光定量PCR检测肠球菌的方法,并对方法的灵敏性、特异性、重复性进行评价,并在临床实践中进行检验.结果表明,所设计的引物能够在阳性样品中扩增出144 bp的目的片段,并且与常见的菌群如绿脓杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等均不发生特异性扩增,检测的灵敏度为17拷贝·μL-1,在临床应用中,荧光定量PCR检测阳性率比普通PCR高18.87%.

主 题 词：肠球菌 16S rDNA 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16445/j.cnki.1000-2340.2014.03.002

馆 藏 号：203873917...