正交试验优化八角ISSR-PCR反应体系

作     者：冯丹 宁德鲁 陈少瑜 李勇杰 张艳丽 吴涛 陈海云 Feng Dan;Ning Delu;Chen Shaoyu;Li Yongjie;Zhang Yanli;Wu Tao;Chen Haiyun

作者机构：云南省林业科学院昆明650201 云南省森林植物培育与开发利用重点试验室国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点试验室昆明650201 

基　　金：云南省“十一五”科技攻关项目(2006NG26) 云南省自然科学基金项目(2010ZC234) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2014年第30卷第8期

页      码：65-69页

摘      要：利用正交试验设计研究Taq DNA聚合酶、DNA模板、引物(UBC 886)、dNTP、Mg2+浓度5个因素对云南八角ISSR-PCR反应的影响,建立其最佳反应体系。结果表明:25μL的反应体系中5个因子的最佳水平为:Mg2+3 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.5 U、DNA模板0.016 ng、引物0.8μmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L。PCR最佳反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,46℃退火45 s,72℃延伸1 min,40次循环;72℃最后延伸7 min,4℃保存。

主 题 词：八角 ISSR-PCR反应 正交设计 体系优化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.08.007

馆 藏 号：203874140...