粘红酵母△^(12)-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达

作     者：杨晓霞 何仕武 魏云林 林连兵 季秀玲 张琦 YANG Xiaoxia;HE Shiwu;WEI Yunlin;LIN Lianbing;JI Xiuling;ZHANG Qi

作者机构：昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650500 

基　　金：国家自然科学基金项目(31160016 31260034) 云南省应用基础研究基金资助项目(KKSA201126005) 教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)资助 

出 版 物：《应用与环境生物学报》 (Chinese Journal of Applied and Environmental Biology)

年 卷 期：2015年第21卷第3期

页      码：421-426页

摘      要：Δ12-脂肪酸脱氢酶一般特异性催化在油酸的Δ12位引入双键转变成亚油酸.为了从粘红酵母YM25079中克隆全长Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列,参考已知的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列设计基因特异性引物,通过PCR扩增获得到全长为1 353 bp的cDNA序列,序列分析结果表明该序列具有一个编码450个氨基酸的完整开放阅读框,所编码蛋白质的大小为50.9×103.与报道的Δ12-脂肪酸脱氢酶一样,推测的氨基酸序列具有膜整合脂肪酸脱氢酶特异性的3个组氨酸保守区,表明该序列为一个新的编码Δ12-脂肪酸脱氢酶的基因.为了验证其功能,把开放阅读框序列亚克隆到表达载体pYES3/CT,构建重组表达载体pYRGD12,并转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达.脂肪酸气相色谱(GC)分析表明,该序列所编码的蛋白质具有Δ12-脂肪酸脱氢酶活性,能将油酸转化为亚油酸,亚油酸的含量占酵母总脂肪酸的4.31%.以上结果表明,PCR所获得序列是新的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因.

主 题 词：粘红酵母 Δ12-脂肪酸脱氢酶 亚油酸 克隆和表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/SP.J.1145.2014.11024

馆 藏 号：203874473...