基于交配型基因的酶切扩增多态性序列鉴定双孢蘑菇核型

作     者：冯志勇 陈辉 汪虹 黄建春 郝海波 王倩 宋晓霞 隽加香 张津京 FENG Zhiyong;CHEN Hui;WANG Hong;HUANG Jianchun;HAO Haibo;WANG Qian;SONG Xiaoxia;JUAN Jiaxiang;ZHANG Jinjing

作者机构：南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 

基　　金：上海市现代农业产业技术体系[沪农科产字(2019)第9号] 

出 版 物：《食用菌学报》 (Acta Edulis Fungi)

年 卷 期：2019年第26卷第4期

页      码：9-15页

摘      要：为建立鉴定双孢蘑菇(Agaricus bisporus)核型的方法,根据GeneBank公布的其基因组信息,针对交配型基因序列设计特异性引物,以W192两个不同核型的同核体菌株A1和A2的菌丝体基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得交配型基因序列,筛选存在差异的序列,预测基因片段的限制性内切酶位点,筛选最佳酶切位点,根据酶切片段的差异鉴定菌株的交配型。结果表明:筛选得到长度为736 bp的基因序列,将其命名为aba1;核型为A1的同核体菌株,采用内切酶EcoRⅤ可以将aba1酶切成大小为257 bp和479 bp的两个片段;核型为A2的同核体菌株,采用内切酶XhoⅠ可以将aba1酶切成大小为327 bp和409 bp的两个片段;如果同时可以被两种限制性内切酶酶切,说明该菌株为异核体。采用基因测序鉴定了5株标记为孢子同核体的菌株和8株标记为原生质体同核体的菌株,测序结果表明:5株标记为孢子同核体的菌株中176P11、176P14和176P17的核型属于A1型,176P12和176P19属于A2型;8株标记为原生质体同核体的菌株中101-1P75和03P75的核型为A1型;152P11、46P23、46P27和152P2为A2型;03P46和176P21属于异核体;同时又采用笔者建立的内切酶方法鉴定了这些菌株,核型与基因测序鉴定结果相同。

主 题 词：双孢蘑菇 交配型基因 核型 限制性内切酶 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071001[071001] 07[理学] 

D　O　I：10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.04.002

馆 藏 号：203878509...