血栓形成易感基因芯片的研制及效果评价

作     者：冉楠 马明星 庞志强 王泽雨 刘月 郑瑞鹏 卢俊英 张超 陈光 章宏 王放 RAN Nan;MA Mingxing;PANG Zhiqiang;WANG Zeyu;LIU Yue;ZHENG Ruipeng;LU Junying;ZHANG Chao;CHEN Guang;ZHANG Hong;WANG Fang

作者机构：吉林大学基础医学院病原生物学系吉林长春130021 吉林寰基生物科技有限公司吉林长春130021 吉林大学基础医学院生理学系吉林长春130021 吉林大学第一医院血管外科吉林长春130021 

基　　金：吉林省发改委产业创新专项资金资助课题(2016C050-3) 吉林省科技厅中药办科技成果转化计划项目资助课题(20170311040YY) 吉林省发改委产业技术研究与开发项目资助课题(2017C058-1) 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2020年第46卷第1期

页      码：182-187,I0007页

摘      要：目的:探讨血栓形成易感基因芯片的研制方法及初步临床验证,建立一种快速且高通量检测血栓形成易感基因突变的方法。方法:根据GenBank上已发表的血栓形成易感基因序列,将设计好的参照探针和特异性探针点置于醛基化处理的玻片上,经紫外交联后固定,制成血栓形成易感基因芯片。以阳性参考品(各检测位点突变型和正常型基因)和阴性参考品(双蒸水)为模板,经PCR反应后与芯片进行杂交,对基因芯片的有效性进行检测。以靶序列经过测序验证的人类基因组DNA为模板,经PCR反应后芯片进行杂交,检测基因芯片的特异度和灵敏度,并对来自吉林、河南和云南3个地区的健康受试者150人和有不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者24例进行临床验证。分析指标为检测相应位点的杂交信号强度。结果:以阳性参考品和阴性参考品为模板进行杂交,相应位点出现特异性的杂交信号,说明基因芯片检测位点有效。用于检测选定突变位点的基因芯片均有特异性的杂交信号,说明基因芯片的特异性良好。标准基因组DNA逐级稀释后检测基因芯片的灵敏度为50~100mg·L-1。临床验证结果,在健康受试者150人中8人检出血栓形成易感基因突变,在有不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者24例中20例检出血栓形成易感基因突变,该芯片对不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者血栓形成易感基因突变检出率明显高于健康受试者(P<0.05)。结论:研制的血栓形成易感基因芯片具有良好的特异度和灵敏度,对血栓形成易感基因有较高的检出率,在血栓性疾病的早期诊断和易感风险评估中具有潜在价值。

主 题 词：血栓形成易感基因 基因芯片 聚合酶链式反应 血栓性疾病 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 100201[100201] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.13481/j.1671-587x.20200132

馆 藏 号：203878566...