对虾白斑综合征病毒可视化环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法的建立

作     者：吴丽云 WU Liyun

作者机构：福建省水产研究所福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室 

基　　金：福建省种业创新与产业化工程海洋与渔业项目(2017FJSCZY02) 厦门市科技计划项目2017产学研协同创新及科技合作项目(2016S0870) 2018年福建省海洋经济发展补助资金项目(FJHJF-L-2018-3) 2019年福建省海洋与渔业结构调整专项(2019HYJG02) 福建省省属公益类科研院所基本科研专项(2019R1013-2) 

出 版 物：《渔业研究》 (Journal of Fisheries Research)

年 卷 期：2019年第41卷第6期

页      码：478-486页

摘      要：根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)基因保守序列,利用PrimerExplorer V4设计合成4套环介导等温扩增(Loop mediated isothermal amplification,LAMP)特异性引物,每套引物包含两条内引物(FIP和BIP)、两条外引物(F3和B3)和一条环引物(LF或LB)。利用钙黄绿素作为检测指示剂,建立了可视化WSSV的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。以构建的pMD18-WSSV重组质粒为标准模板进行10倍梯度稀释,测定LAMP对WSSV核酸的最低检测限,4套引物组分别建立LAMP方法均在63℃恒温条件反应60 min,结果显示WSSV-2、WSSV-3和WSSV-4的最低检测限分别为2.25~0.225、2.25~0.225和225~22.5 copies/μL。本研究建立的LAMP方法在1 h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果,适用水产养殖的现场检测,为WSSV早期感染的快速检测提供了方法。

主 题 词：对虾 白斑综合征 环介导等温扩增 快速检测 

学科分类：0908[0908] 09[农学] 

D　O　I：10.14012/j.cnki.fjsc.2019.06.003

馆 藏 号：203878649...