猪流行性腹泻病毒变异毒株与传统毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立

作     者：赵攀登 赵胜杰 王岩 邓同炜 卢建洲 刘静静 朱文龙 冀梦瑶 陈益 ZHAO Pan-deng;ZHAO Sheng-jie;WANG Yan;DENG Tong-wei;LU Jian-zhou;LIU Jing-jing;ZHU Wen-long;JI Meng-yao;CHEN Yi

作者机构：河南牧业经济学院动物医学院郑州450046 河南省动物疫病预防控制中心郑州450000 

基　　金：河南牧业经济学院科研创新项目(53000086,53000202) 河南牧业经济学院博士启动基金(53000213,53000137) 河南牧业经济学院教研项目(25000234,84000135) 河南牧业经济学院预防兽医学重点学科(MXK2016102) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2019年第27卷第6期

页      码：94-98页

摘      要：为建立猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异毒株和传统毒株RT-PCR鉴别诊断方法,本研究根据GenBank中PEDV变异毒株(JN381492.1)和传统毒株(JN599150.1)S基因序列,设计两对特异性引物,进行反应条件优化。结果显示:建立的RT-PCR鉴别诊断方法能够特异性区分PEDV变异毒株和传统毒株,能扩增出变异毒株442 bp的目的片段,而传统毒株是270 bp的目的片段,并且与猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪呼肠孤病毒、猪瘟病毒、猪脑心肌炎病毒、轮状病毒均无交叉反应;敏感性结果表明该方法能检测出变异毒株和传统毒株的底限均为4×10^4 copies;利用该方法对42份临床腹泻样品进行检测,PEDV阳性率为69%(29/42),变异毒株占总PEDV毒株的93.1%(27/29),传统毒株占总PEDV毒株的6.9%(2/29)。该RT-PCR方法为PEDV的病原鉴别诊断和流行病学调查提供了技术手段。

主 题 词：猪流行性腹泻病毒 S基因 RT-PCR 鉴别诊断 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203878672...