1株禽传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：金娟 李亚杰 鲍恩东 JIN Juan;LI Yajie;BAO Endong

作者机构：南京农业大学动物医学院江苏南京210095 天津瑞普生物技术股份有限公司瑞普生物研究院天津300308 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第52卷第1期

页      码：115-121页

摘      要：自禽传染性支气管炎病毒流行较严重地区的患鸡组织病料中分离得到1株疑似毒株,利用鸡胚培养、气管环及动物回归试验、电镜观察、RT-PCR等多种方法及对其S1基因序列进行比较分析,确定该分离毒株为禽传染性支气管炎病毒QX型。同时针对该新分离的传染性支气管炎病毒建立了实时荧光定量PCR检测方法。结果显示:针对该分离毒株的S1基因区设计1对引物和TaqMan探针,制备质粒标准品,建立标准曲线,其线性关系为y=-3.385 7x+42.235,R^2=0.999,扩增效率为97.5%,该法能区分常见禽类流行病毒,检测灵敏度可达42.1拷贝数/μL,比普通PCR检测限度高,重复性良好,因而该实时荧光定量PCR检测方法可靠。本试验同时进行了拷贝数与半数鸡胚感染量(EID50)对应关系研究,证明了在控制病毒代次、冻融次数等条件下,建立线性关系为y=0.249 2x+1.341×10^6(以拷贝数为x轴,EID50为y轴),R^2=0.956 4,可实现拷贝数替代EID50。

主 题 词：S1基因 实时荧光定量PCR 传染性支气管炎病毒 禽 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203878769...