呼吸道合胞病毒实时荧光定量PCR检测

作     者：张其威 游上游 孙继民 吴旗 余春华 张楚瑜 ZHANG Qi-wei;YOU Shang-you;SUN Ji-min;WU Qi;YU Chun-hua;ZHANG Chu-yu

作者机构：武汉大学病毒学教育部重点实验室湖北武汉430072 武汉市儿童医院湖北武汉430016 

出 版 物：《第一军医大学学报》 (Journal of First Military Medical University)

年 卷 期：2005年第25卷第7期

页      码：847-852页

摘      要：目的建立一种快速、准确诊断人呼吸道合胞病毒(hRSV)早期感染的实时荧光定量PCR检测方法。方法以hRSV最保守的N基因序列为参考,设计两对特异的引物和一条TaqMan荧光探针,在LightCycler定量PCR检测仪上对93例下呼吸道感染患儿进行hRSVRNA检测,并与病毒分离培养、常规PCR、巢式PCR方法和ELISA法相比较。结果以PCR模板浓度来定义,该方法线形范围为1×102￣1×107cDNAcopies/μl,灵敏度达1×102cDNAcopies/μl,和巢式PCR相同,比常规PCR高10倍。用人脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、柯萨奇病毒2型、甲型、乙型流感病毒、腺病毒7型作对照,均无预期扩增产物和荧光的产生;该方法在LightCycler和Rotor-Gene两种仪器上的定量结果具有一致性;采用该法对93例患儿行FQ-PCR检测出阳性44例(43.9%),ELISA方法检测阳性4例(4.3%),两者相关性不高。hRSV浓度的高低与患儿临床症状之间的关系不是很明显。结论该方法可快速、灵敏、特异、定量检测hRSV,在hRSV感染的早期诊断和疗效监测方面具有良好的应用前景。

主 题 词：呼吸道合胞病毒 实时监测 灾光定量PCR Taqman 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-4254.2005.07.021

馆 藏 号：203878917...