农杆菌介导的大豆成熟胚芽尖遗传转化体系的优化

作     者：杨海英 朱丹华 胡小丽 杨清华 袁凤杰 董德坤 

作者机构：浙江师范大学浙江金华321004 浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所 杭州国家大豆改良分中心浙江杭州310021 

基　　金：转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08004-006B) 

出 版 物：《核农学报》 (Journal of Nuclear Agricultural Sciences)

年 卷 期：2011年第25卷第4期

页      码：665-672页

摘      要：以大豆品种‘浙春3号’的胚芽尖为受体材料,利用农杆菌介导法转化抗逆相关大豆转录因子GmGT-2A,为探讨过量表达该基因以提高大豆对非生物胁迫的抗逆性准备材料,通过研究预培养时间、共培养培养基的6-BA浓度、侵染时间等因子对转化效率的影响,系统优化了大豆的成熟胚芽尖转化体系。单因素优化实验结果表明:预培养时间、6-BA浓度和侵染时间均对大豆遗传转化有显著的影响,三者各自最优条件分别为胚芽尖预培养时间1.5d;共培养基6-BA浓度8mg/L和浸染时间10h。根据以上结果设计三因素三水平正交试验对转化体系进行系统优化,结果表明:以上因素对转化效率的影响程度从大到小依次为:侵染时间、预培养时间和6-BA浓度;最佳转化体系中各因素水平与单因素优化结果一致。本研究获得的最高平均转化效率为5.67%。实验还初步探讨了IBA浓度对再生苗生根的影响,结果表明在生根培养基中不加入IBA比加入IBA时生根时间短,且生根数量多,移栽易成活。利用上述方法得到的抗性苗,经目的基因、标记基因和构建特异性的PCR检测,表明目的基因已成功导入到大豆基因组中。

主 题 词：大豆 根癌农杆菌 胚芽尖 遗传转化 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203879392...