氨基酸定点突变提高灵芝蛋白LZ-8热稳定性的研究

作     者：孙熙麟 蒋振彦 刘志屹 戴璐 孙非 黄伟 SUN Xi-lin;JIANG Zhen-yan;LIU Zhi-yi;DAI Lu;SUN Fei;HUANG Wei

作者机构：吉林大学药学院长春130021 吉林大学再生医学科学研究所长春130021 

基　　金：吉林省科技成果转化计划(201603064YY) 吉林省科技攻关计划(20150204048YY) 吉林省科技创新人才培育计划(20160520042JH) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2020年第36卷第1期

页      码：23-28页

摘      要：通过氨基酸定点突变技术提高灵芝免疫调节蛋白LZ-8的热稳定性。通过分子动力学模拟结合温度因子预测对LZ-8氨基酸突变位点进行理性设计,在毕赤酵母X33菌株内构建并表达LZ-8突变体蛋白,采用HeLa细胞生长抑制实验和差示量热扫描分析检测并比较了LZ-8突变前后生物学活性及热力学参数。结果显示,LZ-8 N-端α螺旋为理论预测的温度敏感区域,在该区域进行F8W和R9K氨基酸双位点突变,突变后的LZ-8热稳定性提高,相变温度Tm上升0.92℃,相转变焓值ΔH提高23.14 kJ/mol,但突变后LZ-8生物学活性基本不变,LZ-8和LZ-8突变体对HeLa细胞生长抑制的IC50值分别是2.238μg/mL和2.407μg/mL。通过理性设计氨基酸突变位点,获得了稳定性提高但生物学活性不变的灵芝免疫调节蛋白LZ-8的突变体。

主 题 词：LZ-8 热稳定性 分子动力学模拟 温度因子 定点突变 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0529

馆 藏 号：203879778...