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巨细胞病毒pp65抗原检测的新方法

巨细胞病毒pp65抗原检测的新方法

作     者:阮光萍 王金祥 姚翔 庞荣清 邓永丽 吕燕波 王强 马丽花 潘兴华 

作者机构:解放军昆明总医院干细胞与组织器官工程研究中心650032 

基  金:国家自然科学基金面上项目资助(31172170) 中国博士后科学基金特别资助(201104748) 

出 版 物:《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期:2012年第28卷第4期

页      码:333-336页

摘      要:目的传统的检测CMVpp65抗原的方法是间接免疫荧光,操作麻烦,步骤较多,整个实验需要6个多小时,而且只能定性。需要寻找一种简便的可以定量的方法来检测CMVpp65抗原阳性细胞。因此我们设计了流式的方法来检测CMVpp65抗原阳性细胞。方法我们用间接免疫荧光试剂盒中的一抗和购自invitrogen公司的二抗进行了流式标记移植病人外周血中的WBC,操作步骤明显简便了,只需不到2 h就可完成检测,而且可以定量检测CMVpp65抗原阳性细胞。同时我们用荧光定量PCR检测病人尿中的CMV基因的拷贝数。结果流式检测阳性率高的标本,用间接免疫荧光方法检测也为阳性,同时流式检测强阳性的病人尿用荧光定量PCR检测到CMV基因,表明病人处于CMV病毒血症。结论我们用间接免疫荧光试剂盒中的一抗和购自invitrogen公司的二抗进行流式标记,成功检测了移植病人的CMVpp65抗原阳性细胞的百分比,新方法可以定量,与荧光定量PCR方法检测病人尿中的CMV基因的结果符合率较高,可以推广应用。

主 题 词:巨细胞病毒 pp65抗原 间接免疫荧光 流式细胞术 荧光定量PCR 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13431/j.cnki.immunol.j.20120076

馆 藏 号:203880010...

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