一种广泛适用的RNA提取方法

作     者：淳俊 郑彦峰 王胜华 陈放 CHUN Jun;ZHENG Yan-Feng;WANG Sheng-Hua;CHEN Fang

作者机构：四川大学生命科学学院成都610064 

基　　金：国家自然科学基金(30270090) 四川大学科研启动基金资助项目~~ 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2008年第35卷第5期

页      码：591-597页

摘      要：分离提取高质量的RNA是基因表达、调控与基因工程等研究的基础,而RNase、多糖及多酚类物质严重干扰RNA的分离提取过程.现利用硅藻土对RNase的吸附性,结合PVP、高盐及乙二醇丁醚沉淀等处理,建立了一种广泛适用的RNA提取方法.在富含多糖的玉米胚乳,富含RNase的动物肝脏,多酚多油脂的银杏、麻疯树以及木霉、酵母等10多种RNA提取困难的动、植物与微生物材料中都提取出完整性好,得率高的***-PCR实验表明,提取的RNA能够用于后续的分子生物学研究.硅藻土-苯酚法提取RNA的得率是异硫氰酸胍法的3倍多.此外,将分离提取的总RNA经过LiCl与PEG8000加NaCl沉淀步骤有效地去除了大片段RNA,以水稻Osa-mir-156的成熟序列设计特异引物做茎环RT-PCR,结果证明,富集得到的小RNA可以用于miRNA克隆等后续实验.

主 题 词：硅藻土 RNA提取 小RNA 乙二醇丁醚 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-3282.2008.05.016

馆 藏 号：203880372...