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食源性致病大肠杆菌O157:H7毒力基因rfbE的LAMP检测方法的建立

食源性致病大肠杆菌O157:H7毒力基因rfbE的LAMP检测方法的建立

作     者:肖蕊 李春节 冯世文 施君 韦秀颖 苏刘榕 陈小红 胡庭俊 韦英益 Xiao Rui;Li Chunjie;Feng Shiwen;Shi Jun;Wei Xiuying;Su Liurong;Chen Xiaohong;Hu Tingjun;Wei Yingyi

作者机构:广西大学动物科学技术学院南宁530005 广西兽医研究所南宁530001 

基  金:广西科技重大专项计划项目(桂科重14121003-4-1) 广西大学“大学生创新创业训练计划”项目(2017-10593281)共同资助 

出 版 物:《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期:2019年第38卷第12期

页      码:5465-5469页

摘      要:根据GenBank中的大肠杆菌0157:H7毒力基因rfbE保守序列,应用LAMP引物的设计软件Primer Explorer V4设计针对靶基因rfbE的引物、设计反应程序与体系,成功建立检测致病大肠杆菌的LAMP检测方法。结果表明,该LAMP方法具有良好的敏感性、特异性及荧光可视化判定效果。该方法对目的菌株纯菌DNA可被检出的最低限可达到1.69×10-4 ng/μL;对9种相关细菌进行LAMP方法检测,大肠杆菌0157:H7为阳性结果,其余菌株均显示阴性,阳性检出率为100%;优化浊度仪监控条件,反应器加入荧光染料,63℃反应1 h后即可观察结果,较PCR方法用时短。结果表明,该LAMP方法具有操作简便、高效快捷等优势,在食品食源性致病大肠杆菌快速检测监测方面具有较高的实用价值。

主 题 词:环介导等温核酸扩增(LAMP) 大肠杆菌O157:H7 毒力基因rfbE 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 071005[071005] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13417/j.gab.038.005465

馆 藏 号:203880832...

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