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油茶种子总RNA提取及Cod8FAD基因的鉴定

油茶种子总RNA提取及Cod8FAD基因的鉴定

作     者:胡姣 谭晓风 张琳 龙洪旭 HU Jiao;TAN Xiao-feng;ZHANG Lin;LONG Hong-xu

作者机构:中南林业科技大学林学院经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 

基  金:国家"十一五"科技支撑项目(2009BADB1B02 2006BAD18B0204) 

出 版 物:《浙江林业科技》 (Journal of Zhejiang Forestry Science and Technology)

年 卷 期:2010年第30卷第2期

页      码:17-21页

摘      要:油茶种子胚乳中富含脂肪、多糖和酚类公合物,要获得高质量的RNA难度较大。本研究以油茶优良无性系湘林1号近成熟种子的胚乳为实验材料,在试剂盒的基础上应用改良的CTAB法提取总RNA。结果表明,使用改良后的CTAB法配合试剂盒提取RNA操作简单,且能够有效去除油茶种子中多糖和多酚类等次生物质,从而得到高质量的RNA。以获得的RNA为模板,设计简并引物,通过RT-PCR,成功从油茶种子中鉴定出了油脂合成的关键酶基因之一△8脂肪酸脱饱和酶基因,命名为Cod8FAD(Camellia oleifera delta 8 fatty acid desaturase),该基因与茶树△8脂肪酸脱饱和酶基因相似性最高,为97%,与耧斗菜△8脂肪酸脱饱和酶基因相似性最低,为62%。

主 题 词:油茶 RNA提取 改良CTAB法 RT-PCR 

学科分类:090704[090704] 0907[农学-草药学] 09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-3776.2010.02.004

馆 藏 号:203881468...

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