鸭Toll样受体3实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：宋凯杰 陈宗艳 黄云秀 李传峰 孟春春 李丹丹 张淼涛 刘光清 SONG Kai-jie;CHEN Zong-yan;HUANG Yun-xiu;LI Chuan-feng;MENG Chun-chun;LI Dan-dan;ZHANG Miao-tao;Liu Guang-qing

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 西北农林科技大学动物医学院杨凌712100 广西大学动物科学技术学院南宁530005 

基　　金：农业部公益性行业科研专项(201303046) 国家自然科学基金项目(31270194 31101848) 上海市科委创新项目(13391901602) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2015年第23卷第3期

页      码：42-49页

摘      要：根据鸭Toll样受体3（Toll-like receptor 3,TLR3）的基因序列保守区设计特异性引物,以鸭β肌动蛋白（β-actin）mRNA为内参,建立了一种检测鸭TLR3 mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法。该方法的标准曲线在1×102～1×108copies/μL范围内,具有良好的线性关系,相关系数和扩增效率均在0.9以上。熔解曲线显示,PCR产物为单峰,具有高度扩增特异性。重复性结果表明,该方法组内、组间变异系数均小于3%,最低检测浓度达100 copies/μL。利用该方法检测了TLR3在鸭组织器官中的表达和分布情况,结果表明,TLR3在鸭子的各种组织或器官中均有分布,其中以气管的表达水平最高,而在脾脏的表达水平最低。该检测方法的成功建立为研究TLR3在鸭天然免疫过程中的生物学功能提供了良好的技术手段。

主 题 词：TLR3 荧光定量PCR 北京鸭 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-6422.2015.03.008

馆 藏 号：203881550...