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金黄色葡萄球菌中毒性休克综合征毒素-1 PCR检测方法的建立与初步应用

金黄色葡萄球菌中毒性休克综合征毒素-1 PCR检测方法的建立与初步应用

作     者:张晓丽 陈卓 于佳鑫 孙悦青 王洋 栾剑 周晓梅 郭海勇 ZHANG Xiaoli;CHEN Zhuo;YU Jiaxin;SUN Yueqing;WANG Yang;LUAN Jian;ZHOU Xiaomei;GUO Haiyong

作者机构:吉林师范大学生命科学学院 

基  金:吉林省教育厅“十三五”科学技术研究规划项目(JJKH20170382KJ) 吉林师范大学大学生科研基金项目(17184) 

出 版 物:《河北农业大学学报》 (Journal of Hebei Agricultural University)

年 卷 期:2019年第42卷第6期

页      码:97-102页

摘      要:试验旨在建立敏感、特异快速检测金黄色葡萄球菌超抗原中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)的PCR方法。根据TSST-1毒素基因(tst基因)的序列,设计合成了特异性引物,优化了PCR方法的引物浓度、退火温度及DNA模板量,测定了方法的灵敏度与特异性,并应用所建立的PCR方法检测了67株金黄色葡萄球菌分离株中的tst基因。结果表明,建立的PCR方法的最佳退火温度为55℃、引物浓度为0.4μmol/L,检测灵敏度为20 pg DNA,与表皮葡萄球菌、猪链球菌、四联球菌、沙门氏菌和大肠杆菌等均不发生交叉反应。在67株金黄色葡萄球菌分离株中,13株携带tst基因,其中鸡源分离株中携带tst基因的菌株约占9.1%(1/11),牛源分离株中携带tst基因的菌株约占21.4%(12/56)。本研究建立的PCR方法能够快速、特异、敏感地检测金黄色葡萄球菌超抗原TSST-1毒素基因,为动物源性食品中TSST-1的检测及产TSST-1毒素菌株的流行病学调查提供重要技术支持。

主 题 词:金黄色葡萄球菌 超抗原 中毒性休克综合征毒素-1 PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.13320/j.cnki.jauh.2019.0128

馆 藏 号:203882070...

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