HBV C编码链抗HBV潜在药物靶标的设计、筛选及鉴定

作     者：许桂丹 肖树荣 韦武均 彭彬 农顺强 邓益斌 XU Guidan;XIAO Shurong;WEI Wujun;PENG Bin;NONG Shunqiang;DENG Yibin

作者机构：右江民族医学院附属医院医学检验科广西百色533000 广东省阳江市人民医院检验科广东阳江529500 广西肝胆疾病临床医学研究中心广西百色533000 右江民族医学院附属医院感染性疾病科广西百色533000 

基　　金：国家自然科学基金(81460123) 广西自然科学基金(2018GXNSFAA281187) 广西肝胆疾病临床医学研究中心(桂科AD17129025-04) 广西卫生和计划生育委员会自筹经费科研课题(Z20180219) 百色市科学研究与技术开发计划项目(百科计20182513) 博导培育计划人选项目(右医附院院字32号) 博点学科建设项目(右医附院院字29号) 

出 版 物：《右江医学》 (Chinese Youjiang Medical Journal)

年 卷 期：2020年第48卷第1期

页      码：12-16页

摘      要：目的针对HBV C编码链设计合成反基因锁核酸(locked nucleic acid,LNA)片段,以HepG2.2.15细胞为研究对象,筛选并鉴定出能特异性阻断HBV复制和表达的有效治疗靶点药物。方法利用RNAstructure 5.0软件针对HBV C区编码链1914~1928 nt、1969~1983 nt、2002~2016 nt、2053~2067 nt、2069~2073 nt、2162~2176 nt和2404~2418 nt位点设计合成7条反基因LNA片段(分别以SQ1~SQ7表示),以阳离子脂质体lipofectamine 3000(lipo3000)介导转染HepG2.2.15细胞,隔3天对应给药,连续给药3次,分别于给药后第3、6、9天收集培养上清液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBeAg水平;实时荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)测定HBV-DNA浓度。结果针对HBV C区编码链2162~2176 nt(SQ6)和2404~2418 nt(SQ7)位点的反基因LNA片段对HBV-DNA复制和HBeAg表达的抑制效果最明显,用药后第3、6、9天,SQ6对HBeAg的平均抑制率分别为43.91%、59.95%和59.07%,HBV-DNA则分别为42.91%、50.09%和51.14%;SQ7对HBeAg的平均抑制率分别为44.18%、60.81%和60.02%,HBV-DNA则分别为47.28%、54.16%和52.22%。结论针对HBV C区编码链2162~2176 nt和2404~2418 nt位点的反基因LNA片段体外能有效抑制HBV的复制和表达,为抗HBV治疗提供一定的理论依据和实验依据。

主 题 词：乙型肝炎 乙型肝炎病毒 锁核酸 基因治疗 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.01.003

馆 藏 号：203882258...