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高致病性H7N9流感病毒RT-LAMP检测方法的建立

高致病性H7N9流感病毒RT-LAMP检测方法的建立

作     者:黄海超 徐日文 杨素 陈轩 邵建宏 沙才华 罗宝正 赵福振 廖秀云 HUANG Haichao;XU Riwen;YANG Su;CHEN Xuan;SHAO Jianhong;SHA Caihua;LUO Baozheng;ZHAO Fuzhen;LIAO Xiuyun

作者机构:拱北海关技术中心 

基  金:海关总署科技项目(2017IK153) 拱北海关科技项目(ZH2017-9) 

出 版 物:《广东畜牧兽医科技》 (Guangdong Journal of Animal and Veterinary Science)

年 卷 期:2020年第45卷第1期

页      码:39-42,52页

摘      要:2017年2月广东CDC首次报告了一种新的H7N9流感病毒变异株,该变异株在血凝素(HA)基因的裂解位点发生了插入型突变,从而成为对禽高致病性的H7N9流感病毒(HP-H7N9)。因此,急需建立一种快速简便的H7N9流感病毒检测方法。根据HP-H7N9的HA基因序列,设计一组HP-H7N9特异性的RT-LAMP引物,在对反应体系进行优化的基础上,建立了HP-H7N9的RT-LAMP检测方法并进行了特异性试验、敏感性试验。结果显示,本方法只对HP-H7N9特异性扩增,而对低致病性H7N9病毒(LP-H7N9)、H7N3流感病毒(H7N3)、H3N2流感病毒(H3N2)、H5N1禽流感病毒(H5N1)、H9亚型禽流感病毒(H9)、新城疫病毒(NDV)、甲型H1N1流感病毒(H1N1)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)等病原未见扩增。该方法最低能够检测到2.97×105 copies(10-6稀释度)的阳性质粒,具有良好的检测灵敏度。本方法操作简便,对设备需求较低,试验耗时短,反应结果可直接肉眼观察判读,适用于基层兽医站所、养殖场及野外监测点的HP-H7N9的快速筛查和监测。

主 题 词:高致病性 H7N9 流感病毒 RT-LAMP 检测方法 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203884718...

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