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牙鲆抗菌肽hepcidin基因在大肠杆菌中的融合表达

牙鲆抗菌肽hepcidin基因在大肠杆菌中的融合表达

作     者:李伟 陈松林 Li Wei;Chen Songlin

作者机构:中国海洋大学海洋生命学院青岛266003 中国水产科学院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071 

基  金:973计划(2004B117403)、863计划(2002AA626010)和国家自然科学基金(40376047)资助项目 

出 版 物:《高技术通讯》 (Chinese High Technology Letters)

年 卷 期:2007年第17卷第7期

页      码:765-770页

摘      要:根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽hepcidin基因(GenBank登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体pGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽hepcidin基因融合表达载体pGEX-fhep,转化至大肠杆菌BL21(DE3)plyS中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导.SDS-PAGE电泳显示在29kD处有特异性的蛋白条带出现,Western-blotting 检测表明已经成功表达了融合蛋白,表达的融合蛋白最高占总蛋白的21%.纯化得到的GST-fhep用凝血酶切割后,用亲合层析得到牙鲆的抗菌肽hepcidin.抑菌实验结果表明抗菌肽对大肠杆菌(ATCC25922)有一定程度的抑制作用.

主 题 词:牙鲆 抗菌肽 hepcidin 大肠杆菌 表达 活性 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1002-0470.2007.07.020

馆 藏 号:203886413...

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