SHP-2shRNA联合苦参碱对宫颈癌细胞增殖的影响

作     者：魏林珍 奉容花 王海琳 Wei Linzhen;Feng Ronghua;Wang Hailin

作者机构：甘肃省人民医院妇科兰州730000 兰州大学第一临床医学院兰州730000 

基　　金：国家自然科学基金地区科学基金项目(编号:81260387) 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2020年第55卷第2期

页      码：190-195页

摘      要：目的应用RNA干扰技术构建SHP-2基因重组慢病毒载体,研究SHP-2shRNA联合苦参碱对宫颈癌Hela细胞生长增殖的影响。方法靶向构建SHP-2的shRNA序列慢病毒载体,将其转染至人宫颈癌Hela细胞以沉默SHP-2基因,用Real-time PCR(RT-PCR)测定Hela细胞SHP-2 mRNA,应用Western blot法测定SHP-2蛋白表达,CCK8法测定SHP-2基因沉默联合苦参碱对Hela细胞增殖的影响。结果设计并成功构建3组SHP-2基因的干扰序列(SHP-2 shRNA1、SHP-2 shRNA2和SHP-2 shRNA3)以及对照序列(NS),RT-PCR检测结果表明SHP-2 shRNA2慢病毒载体干扰效率最佳。筛选稳定细胞后荧光显微镜观察感染效率较高,Western blot结果显示细胞中SHP-2蛋白表达明显被抑制。CCK8提示细胞的生长增殖能力明显受限,且随着时间延长,联合组(SHP-2 shRNA2+苦参碱)增殖最慢,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建出SHP-2基因的shRNA慢病毒干扰系统,SHP-2基因沉默联合苦参碱可影响宫颈癌细胞增殖。

主 题 词：SHP-2 慢病毒载体 宫颈癌细胞 增殖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.02.007

馆 藏 号：203887304...