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检测猪粪便中基因4型戊型肝炎病毒的实时荧光定量RT-PCR方法的建立

检测猪粪便中基因4型戊型肝炎病毒的实时荧光定量RT-PCR方法的建立

作     者:贾鹏 金宁一 李霄 朱光泽 刘妍 高鹏 徐晓红 杨恩成 孟日增 阚式绂 

作者机构:军事医学科学院全军基因工程重点实验室长春130062 吉林大学长春130062 长春中医药大学长春130021 吉林省进出口检验检疫局长春130062 

基  金:国家自然科学基金(30771609) 

出 版 物:《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期:2010年第26卷第1期

页      码:33-39页

摘      要:针对基因4型戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)基因组ORF3设计特异性引物和探针,建立了一套TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法。评价了该方法的准确性和灵敏性,同时与常规RT-PCR和巢式RT-PCR方法进行了对比分析。结果表明,生成的标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r2)为0.994,斜率为-3.312,PCR效率为100%。组内和组间重复性试验相同稀释度标准质粒Ct值之间差异均不显著,并且能够准确的从HEV阳性猪粪便样品中检测到基因4型HEV RNA,具有较好准确性。可检测到戊型肝炎病毒数量为(1.7×101)copies,比普通RT-PCR的灵敏度高100倍,比Nested RT-PCR高10倍。

主 题 词:戊型肝炎病毒 RT-PCR 基因4型 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002050

馆 藏 号:203887337...

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