RNA干扰逆转肾癌细胞A498对长春新碱化疗耐药的研究

作     者：郝怡鑫 杜楠 肖文华 HAO Yi-xin;DU Nan;XIAO Wen-hua

作者机构：解放军总医院第一附属医院肿瘤科北京100037 

出 版 物：《肿瘤研究与临床》 (Cancer Research and Clinic)

年 卷 期：2010年第22卷第6期

页      码：391-395页

摘      要：目的 研究RNA干扰（RNAi）对肾癌细胞多药耐药基因（mdr-1）表达的抑制作用,并分析干扰前后肾癌细胞对长春新碱（VCR）药物敏感性的变化.方法 根据mdr-1基因设计3条小干扰RNA（siRNA）序列,在质粒的介导下转染肾癌A498细胞,RT-PCR法分析转染前后mdr-1 mRNA表达水平,筛选出干扰效率最高的siRNA序列 进而利用慢病毒包装siRNA重组质粒,感染A498细胞,RT-PCR法筛选沉默效果最好的细胞株进行克隆,Western blotting法检测mdr-1蛋白表达水平,MTT法对比干扰前后VCR对细胞半抑制浓度（JC50）的变化 相关数据统计通过SPSS10.0软件进行.结果 siRNA-1序列使mdr-1 mRNA表达水平下降67%,其稳转细胞株mdr-1蛋白表达量明显下降（P〈0.01）,并使VCR对细胞的JG50降低约83.25%（P〈0.01）.结论 RNAi技术可有效抑制肾癌A498细胞mdr-1基因的表达,并可显著增加其对VCR的敏感性,从而使肾癌细胞化疗耐药逆转成为可能.

主 题 词：RNA干扰 RNA,小分子干扰 P糖蛋白 长春新碱 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2010.06.010

馆 藏 号：203887503...