大鲵柱状黄杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断试剂盒的研制

作     者：余波 罗永成 徐景峨 周思旋 杨莉 马永兵 YU Bo;LUO Yong-cheng;XU Jing-e;ZHOU Si-xuan;YANG Li;MA Yong-bing

作者机构：贵州省畜牧兽医研究所贵州贵阳550005 贵州省水产技术推广站贵州贵阳550001 贵阳市水产技术推广站贵州贵阳550004 

基　　金：贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NZ字3023号) 2014年省级财政渔业发展(大鲵产业)专项资金 

出 版 物：《广东农业科学》 (Guangdong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2014年第41卷第21期

页      码：144-148页

摘      要：根据Gen Bank中柱状黄杆菌16S r RNA序列,设计1对特异性引物,PCR扩增获得16S r RNA基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了黄杆菌的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法 ,以此为基础研制试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、迟缓爱德华、弗氏柠檬酸杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达12拷贝/μL。结果表明,研制的柱状黄杆菌SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特征,适合于大鲵临床样品的检测。

主 题 词：大鲵 柱状黄杆菌 16S rRNA基因 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 0906[农学-水产类] 09[农学] 071005[071005] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-874X.2014.21.030

馆 藏 号：203889693...