鳜弹状病毒与传染性脾肾坏死病毒双重PCR检测方法的建立

作     者：梁红茹 范芷仪 蔡秀珠 付小哲 林强 刘礼辉 黄志斌 牛银杰 林蠡 李宁求 LIANG Hongru;FAN Zhiyi;CAI Xiuzhu;FU Xiaozhe;LIN Qiang;LIU Lihui;HUANG Zhibin;NIU Yinjie;LIN Li;LI Ningqiu

作者机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所农业农村部渔用药物创制重点实验室广东省水产动物免疫技术重点实验室广东广州510380 仲恺农业工程学院动物科技学院广东广州570228 

基　　金：中国-东盟海上合作基金项目 广东省促进经济发展专项资金(海洋经济发展用途)项目(GDME-20181007) 广州市珠江科技新星项目(201710010087) 

出 版 物：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2020年第48卷第3期

页      码：39-46,53页

摘      要：【目的】建立鳜弹状病毒(SCRV)和传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的双重PCR检测方法。【方法】分别针对SCRV N基因和ISKNV MCP基因的保守区域设计特异性引物,通过优化退火温度和引物用量(μL)比,建立SCRV和ISKNV的双重PCR检测方法,并对该方法的敏感性和特异性进行检验。应用建立的双重PCR方法对20份临床样品进行单一和双重PCR检测,比较单一和双重PCR的检测结果。【结果】成功建立了SCRV和ISKNV双重PCR方法,该法特异性较强,对草鱼呼肠孤病毒(GCRV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、神经坏死病毒(NNV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)、罗非鱼湖病毒(TiLV)等鱼类常见病毒无扩增;敏感性较好,对2种病毒DNA的检测下限均为0.01 ng/μL。20份临床样品的双重PCR样品检测结果显示,3份为SCRV阳性,11份为ISKNV阳性,2份为SCRV和ISKNV混合感染,结果与单一PCR检测结果一致。【结论】建立的SCRV和ISKNV双重PCR检测方法特异性较强,敏感性较好,可用于鳜鱼SCRV与ISKNV的快速鉴别诊断和分子流行病学调查。

主 题 词：鳜弹状病毒 传染性脾肾坏死病毒 双重PCR 病毒检测 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.13207/j.cnki.jnwafu.2020.03.006

馆 藏 号：203889787...