基于种特异性COI标记的新入侵种甘蓝粉虱快速鉴定技术

作     者：陈苗苗 郭荣 张金良 万方浩 杨锦 张桂芬 CHEN Miao-Miao;GUO Rong;ZHANG Jin-Liang;WAN Fang-Hao;YANG Jin;ZHANG Gui-Fen

作者机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 农业部外来入侵生物预防与控制研究中心北京100193 全国农业技术推广服务中心北京100026 北京市植物保护站北京100029 青岛农业大学农学与植物保护学院山东青岛266109 

基　　金：公益性行业(农业)科研专项(201103026,201303019) 国家“973”计划项目(2009CB119200) 

出 版 物：《昆虫学报》 (Acta Entomologica Sinica)

年 卷 期：2015年第58卷第5期

页      码：579-586页

摘      要：【目的】针对粉虱类害虫种类多、体型微小、形态相似、难以准确快速识别的问题,以新入侵我国大陆的甘蓝粉虱Aleyrodes proletella(L.)为靶标,以田间常见的其他10种/隐种粉虱为参照,采用基于线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基I(mitochondrial DNA cytochrome c oxidase subunit I,mt DNA COI)基因的种特异性(species-specific COI,SS-COI)PCR方法,研究其快速分子检测技术。【方法】利用mt DNA COI基因通用型引物LCO-1490/HCO-2198获得甘蓝粉虱及其他常见粉虱的COI序列,根据测序结果设计种特异性SS-COI引物1对(APZYJF/APZYJR),其扩增片段大小为384 bp,同时对该对引物的种特异性及灵敏性进行检测。【结果】种特异性检验结果显示,该对引物仅对甘蓝粉虱的mt DNA COI基因具有扩增效果,对我国常见的其他种类的粉虱包括温室粉虱Trialeurodes vaporariorum(Westwood)、柑橘粉虱Dialeurodes citri(Ashmead)、螺旋粉虱Aleurodicus disperses(Russell)、双钩巢粉虱Paraleyrodes pseudonaranjae Martin、非洲伯粉虱Bemisia afer(Priesner et Hosny)以及烟粉虱***(Gennadius)5个隐种(MED,Asia I,Asia II 1,Asia II 3和China 1)等不具有交叉反应扩增能力。灵敏性检验结果显示,该对引物不仅对不同性别的成虫具有良好的扩增效能,对2-4龄若虫甚至单粒卵或单头初孵若虫亦具有同样的扩增能力,其最低检测阈值为14.00±0.37 pg/μL(相当于1/25 600头雌性成虫)。【结论】该技术体系完全可用于甘蓝粉虱的快速准确识别及检测监测,对有效阻截其进一步扩张蔓延意义重大。

主 题 词：甘蓝粉虱 隐种 种特异性SS-COI引物 快速鉴定 分子检测 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 

核心收录：

D　O　I：10.16380/j.kcxb.2015.05.013

馆 藏 号：203895101...