建立快速检测委内瑞拉马脑炎的RT-LAMP技术

作     者：曹杨 李环 冯龙斐 陈璐萍 胡博然 袁静 Cao Yang;Li Huan;Feng Longfei;Chen Luping;Hu Boran;Yuan Jing

作者机构：扬州大学旅游烹饪学院食品科学与工程学院225009 中国人民解放军疾病预防控制中心北京100071 河南科技学院新乡453000 上海海洋大学食品学院201306 首都儿科研究所细菌室北京100020 

基　　金：国家重大科技专项(2016ZX09J16105-001-004) 国家重点研发计划项目(2016YFC1202702) 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2020年第34卷第1期

页      码：78-82页

摘      要：目的利用逆转录-环介导等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)建立快速检测委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelan equine encephalitis virus,VEEV)的方法。方法针对VEEV nsp1基因序列,设计了5套特异性引物进行筛选,再对反应温度进行优化,最后进行特异性、灵敏性及重复性评价。结果RT-LAMP检测VEEV的最适温度在65℃;同时选取11种病毒进行RT-LAMP,证明了RT-LAMP具有高特异性;运用RT-qPCR与RT-LAMP对比灵敏性,结果表现为RT-LAMP检测的灵敏性超RT-qPCR检测的100倍。针对VEEV进行RT-LAMP的重复性实验,结果为具有较好的重复性。结论RT-LAMP检测VEEV法具有简单快速高效的特点,且装置简单,特异性强、灵敏性高、重复性好。

主 题 词：委内瑞拉马脑炎病毒 环介导等温扩增 快速检测 nsp1基因 

学科分类：1006[医学-中西医结合类] 1002[医学-临床医学类] 09[农学] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2020.01.016

馆 藏 号：203901308...