LAMP技术检测非小细胞肺癌患者外周血EGFR基因L858R位点突变方法的建立及应用

作     者：钮静 权文强 李冬 NIU Jing;QUAN Wenqiang;LI Dong

作者机构：上海市宝山区中西医结合医院检验科上海210900 同济大学附属同济医院检验科上海200065 

基　　金：上海市第四轮公共卫生体系建设三年行动计划(15GWZK0301) 

出 版 物：《检验医学》 (Laboratory Medicine)

年 卷 期：2020年第35卷第3期

页      码：273-277页

摘      要：目的利用环介导等温扩增(LAMP)技术建立非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血靶点表皮生长因子受体(EGFR)基因L858R位点突变的快速筛查方法。方法在Genebank上查找EGFR 21号外显子(L858R)的DNA序列,利用Primer Explorer V4软件设计特异性引物,建立LAMP检测方法,并对其特异性和敏感性进行评价。采集11例临床病理诊断为NSCLC患者外周血血浆,以聚合酶链反应(PCR)扩增结果为标准,对建立的LAMP方法的准确性进行验证。结果采用自行设计的LAMP引物及构建的反应体系可特异性扩增EGFR L858R位点突变阳性DNA,检测敏感性为0.1%,特异性达到100%。LAMP法在11例EGFR L858R位点突变阳性的NSCLC患者血浆标本中检测到9例阳性。结论成功建立了LAMP检测人外周血浆EGFR基因突变方法,诊断敏感性、特异性和准确性均较高,可荧光目测判读检测结果,是一种简单、快速的EGFR基因突变筛查方法。

主 题 词：环介导等温扩增 表皮生长因子受体 循环肿瘤DNA 即时检验 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-8640.2020.03.018

馆 藏 号：203901394...