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快速检测双芽巴贝斯虫LAMP方法的建立

快速检测双芽巴贝斯虫LAMP方法的建立

作     者:王素华 蔡渭明 李群 杜爱芳 WANG Su-hua;CAI Wei-ming;LI Qun;DU Ai-fang

作者机构:温州出入境检验检疫局浙江温州325027 绍兴出入境检验检疫局浙江绍兴312000 浙江大学动物预防医学研究所浙江杭州310029 

基  金:国家质检总局立项项目(2009IK007) 

出 版 物:《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期:2011年第38卷第11期

页      码:113-116页

摘      要:为提高双芽巴贝斯虫(Babesia bigemina)检出率,本研究采用环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种快速、灵敏、特异的***检测方法。根据GenBank上公布的Babesia bigemina细胞色素b(Cytochrome b,cyt b)基因序列,设计4条特异地识别***的cyt b基因6个特殊区域的LAMP引物,优化反应体系和条件,在Bst DNA聚合酶的作用下,65℃反应60min,加入SYBR GreenⅠ后观察。结果表明,该LAMP检测方法特异性强,与牛巴贝斯虫(Babesia bovis)等DNA不发生交叉反应;敏感性高,对***的cyt b基因最小检测值为0.085fg/μL,是一般PCR方法的1000倍。该方法具有简单、快速、低成本的特点,可用于***的基层现场快速检测。

主 题 词:双芽巴贝斯虫 环介导等温扩增技术 检测 cytb基因 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203903568...

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