靶向舌癌Tca8113细胞血管内皮细胞生长因子基因的siRNA表达载体构建及体外抑制作用

作     者：姚志文 刘唯 程由勇 李红玖 李春华 于大海 YAO Zhiwen;LIU Wei;CHENG Youyong;LI Hongjiu;LI Chunhua;YU Dahai

作者机构：广州医学院附属深圳沙井医院口腔科广东深圳518104 广西医科大学口腔医学院广西南宁530021 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:30360111) 

出 版 物：《中国医药导报》 (China Medical Herald)

年 卷 期：2012年第9卷第3期

页      码：28-30页

摘      要：目的构建靶向舌癌Tca8113细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的siRNA表达载体并在体外检测其对VEGF基因表达的抑制作用。方法设计合成靶向舌癌Tca8113细胞VEGF基因的siRNA cDNA序列并与Psilencer2.1-U6-neo连接,构建VEGF-siRNA表达载体(Pu-VEGF-siRNA),酶切鉴定和测序确认后,经脂质体Lipofectamine2000转染入Tca8113细胞,以空载体组为实验对照组(Pu-HK),未转染组为空白对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)和免疫组化方法检测染后Tca8113细胞VEGF蛋白表达差异。结果经过双酶切鉴定和测序分析,成功构建了靶向Tca8113细胞VEGF基因的siRNA表达载体。与实验对照组和空白对照相比较,转染Pu-VEGF-siRNA后Tca8113细胞的VEGF蛋白表达明显下降(P0.05)。结论成功构建了靶向舌癌Tca8113细胞VEGF基因的siRNA表达载体,且该载体在体外能有效抑制Tca8113细胞VEGF蛋白的表达。

主 题 词：血管内皮细胞生长因子 RNA干扰 舌癌 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-7210.2012.03.012

馆 藏 号：203903658...