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长角血蜱4D8基因的克隆与原核表达

长角血蜱4D8基因的克隆与原核表达

作     者:罗金 刘光远 田占成 谢俊仁 沈辉 田美媛 

作者机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 

基  金:国家科技基础条件平台项目(2005DKA21205-3) 甘肃省自然科学基金项目(096RJZA128) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2012年第42卷第6期

页      码:551-556页

摘      要:根据GenBank上登录的蜱4D8基因序列设计引物,用PCR技术从长角血蜱雌蜱研磨组织cDNA中扩增出4D8基因,将其连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T-4D8,并对检测为阳性的克隆进行测序。将该基因重组至原核表达载体pGEX-4T-1,经表达纯化后,进行Western-blot试验鉴定其生物学活性。结果,长角血蜱4D8基因的氨基酸序列与青海血蜱、肩突硬蜱的同源性分别为90%、81%。表达的重组蛋白是分子质量约为41ku的融合蛋白。Western-blot试验证明,该重组蛋白能很好地识别兔抗长角血蜱全蜱阳性血清。结果表明,4D8基因作为一种重要的分子标记基因在蜱的流行病学调查方面有着重要的价值,同时作为潜在的候选抗原基因在疫苗的研究方面也有重要意义。

主 题 词:长角血蜱 4D8基因 克隆 原核表达 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2012.06.009

馆 藏 号:203903815...

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