酸乳中葡糖杆菌的LAMP检测方法研究

作     者：李月华 张翠侠 王爽 章晶晶 杨岚 周巍 张岩 LI Yue-hua;ZHANG Cui-xia;WANG Shuang;ZHANG Jing-jing;YANG Lan;ZHOU Wei;ZHANG Yan

作者机构：河北农业大学食品科技学院河北保定071000 河北省食品检验研究院河北省食品安全重点实验室河北石家庄050071 

基　　金：国家自然科学基金项目(31401584) 河北省食药局科技计划项目(PT2014030) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2016年第32卷第2期

页      码：342-346,295页

摘      要：为了给酸乳生产企业提供一种快捷、简便、灵敏的葡糖杆菌的LAMP检测方法,本研究选取葡糖杆菌属的模式菌株氧化葡糖杆菌为代表菌株。根据Gen Bank中公布的氧化葡糖杆菌的16S r RNA(X73820)基因的强特异性序列设计四条引物,优化引物、Mg2+、温度等反应条件,建立了环介导等温扩增技术检测酸乳中葡糖杆菌的方法。对该方法的特异性和灵敏度进行评价,并与PCR方法的灵敏度进行比较。结果显示,该组引物的特异性强,对反应产物进行酶切分析,酶切产物的片段与理论值相符;该LAMP方法检测纯菌的灵敏度为7.5×101 CFU/m L,是PCR检测方法的10倍;用纯菌液对酸奶进行人工污染,提取模拟变质酸奶的DNA进行LAMP扩增,其最低检出限为7.5×102 CFU/m L。综上所述,本研究建立的LAMP检测方法特异性强、灵敏度高,耗时短,实现了对葡糖杆菌的快速检测,在食品检测行业具有很好的应用前景。

主 题 词：葡糖杆菌属 环介导等温扩增 检测 酸乳 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 083203[083203] 

D　O　I：10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.2.050

馆 藏 号：203905504...