3型腺病毒免提取核酸重组酶介导的等温扩增实时荧光检测方法的建立及应用

作     者：王瑞欢 张益 向星宇 湛志飞 李鑫娜 申辛欣 朱贞 张瑞卿 白雪丁 段青霞 凡国豪 张红 马学军 Wang Ruihua;Zhang Yi;Xiang Xingyu;Zhan Zhifei;Li Xinna;Shen Xinxin;Zhu Zhen;Zhang Ruiqing;Bai Xueding;Duan Qingxia;Fan Guohao;Zhang Hong;Ma Xuejun

作者机构：湖南省疾病预防控制中心长沙410005 南华大学公共卫生学院衡阳421001 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 

基　　金：十三五重大项目(2018ZX10711001,2017ZX10104001,2018ZX10713-002) 湖南省重点研发计划(2017SK2101) 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2019年第33卷第6期

页      码：653-657页

摘      要：目的 建立3型腺病毒(human adenovirus 3,HAdV-3)免提取核酸的重组酶介导的等温扩增(recmbinase acid amplification,RAA)实时荧光检测方法。方法 根据HAdV-3基因保守序列分别设计1对引物和1条探针,通过对免提核酸的条件摸索和优化,建立1种免提取核酸,重组酶介导的等温扩增实时荧光检测方法;通过对培养的毒株进行系列稀释,免提取核酸分析该方法的灵敏度;通过检测其他呼吸道病毒的原始样本,评价该方法的特异性;并检测HAdV-3临床样本,与传统的提核酸实时荧光定量PCR方法进行比较。结果 本研究建立的免提取核酸实时荧光RAA方法对10倍系列稀释的HAdV-3毒株进行检测,和实时荧光定量PCR方法相比,灵敏度相当,对应的最低浓度稀释样本的Ct值为36.87,对常见其他型别的呼吸道病毒检测无交叉反应。两种方法对56例HAdV-3阳性临床样本同时检测,结果完全一致。结论 本文首次报道了免提取核酸的实时荧光RAA检测HAdV-3的方法,该方法具有较高的灵敏度和特异性,适合应用于临床实验室及基层单位快速检测HAdV-3。

主 题 词：腺病毒3型 免提取核酸 重组酶介导的等温扩增 检测 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2019.06.020

馆 藏 号：203906712...