寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒三重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者：赖丽金 李阿茜 张全福 孙丽娜 李川 芜为 王芹 梁米芳 李德新 韦艳 李建东 Lai Lijin;Li Aqian;Zhang Quanfu;Sun Lina;Li Chuan;Wu Wei;Wang Qin;Liang Mifang;Li Dexin;Wei Yan;Li Jiandong

作者机构：贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 

基　　金：国家科技重大专项(2018ZX10711001 2016ZX10004222-002) 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2019年第33卷第6期

页      码：632-636页

摘      要：目的 建立一种可以同时鉴别寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的检测方法。方法 通过全球共享数据库中检索下载寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒全基因组序列进行比对分析,估计其保守区,确定靶基因位置,针对这3种病毒分别设计特异性引物和探针,建立三重实时荧光定量RT-PCR检测方法,对方法的特异性、灵敏性和重复性进行评估。结果 所建立实时荧光定量RT-PCR检测方法可检出寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒模拟样本,最低检出限分别为寨卡病16.22拷贝/PCR,基孔肯雅病毒12.02拷贝/PCR,马雅罗病毒体外转录RNA为2.82拷贝/PCR,三重组合检测与3种病毒分别单重检测,灵敏度无明显差别。与登革病毒、汉坦病毒、SFTS病毒、黄热病毒和流感病毒等无交叉反应,检测100份健康人体检血清样本未见非特异性反应,特异性为100%。重复性结果显示,通过选取高、中、低3个不同浓度梯度的病毒核酸或体外转录RNA,3种病毒的标准差均控制在0.5以内,变异系数在2%以下。结论 建立了寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的三重实时荧光定量RT-PCR检测方法,该方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。

主 题 词：寨卡病毒 基孔肯雅病毒 马雅罗病毒 RT-PCR 

学科分类：1007[医学-药学类] 100208[100208] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2019.06.015

馆 藏 号：203907463...