牛流行热病毒TaqMan实时定量PCR检测方法的建立及应用

作     者：汪祥斌 贾坤 贾荣荣 李守军 WANG Xiang-bin;JIA Kun;JIA Rong-rong;LI Shou-jun

作者机构：华南农业大学兽医学院广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室/广东省宠物工程技术研究中心广东广州510642 

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(2017A030310032) 广东省科技计划资助项目(2015B020203005) 广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室项目(2017B030314142) 广东省现代农业科技创新联盟建设项目(2018LM2150) 广州市珠江科技新星计划资助项目(201610010073) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2020年第40卷第3期

页      码：491-495页

摘      要：通过对牛流行热病毒(bovine ephemeral fever virus,BEFV)中G片段保守区的分析,运用SnapGene设计探针、引物,并优化反应条件。运用最适条件对该方法的敏感性、特异性及重复性进行试验,并检测临床采集的样品。结果显示,本方法特异性较好,其对牛蓝舌病病毒、牛赤羽病病毒进行检测的结果为阴性。该方法线性关系较好,在105~10^10拷贝/μL相关系数达到0.998。该方法较为灵敏,可检测到10拷贝/μL。批内和批间分别重复3次试验得到的变异系数平均值结果较低(<3%)。使用该方法对广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室收集的109份牛抗凝血样品进行检测,阳性率为7%。本试验成功建立牛流行热病毒TaqMan实时定量PCR检测方法,并将该方法初步运用于牛流行热病毒的临床检测,为BEFV在临床上的快速检测提供更好的方法。

主 题 词：牛流行热病毒 TaqMan探针 实时定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.03.08

馆 藏 号：203908713...