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miR-33a靶向Lipin1和IRS2调节绵羊前体脂肪细胞分化的研究

miR-33a靶向Lipin1和IRS2调节绵羊前体脂肪细胞分化的研究

作     者:王强 潘洋洋 乔利英 刘建华 赵弼时 刘旭莹 王凤 梁煜 刘文忠 WANG Qiang;PAN Yangyang;QIAO Liying;LIU Jianhua;ZHAO Bishi;LIU Xuying;WANG Feng;LIANG Yu;LIU Wenzhong

作者机构:山西农业大学动物科技学院太谷030801 

基  金:国家自然科学基金(31972560) 山西省“1331工程”重点学科建设计划(J201811301) 

出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期:2020年第51卷第4期

页      码:701-712页

摘      要:旨在揭示miR-33a在绵羊前体脂肪细胞分化中的生物学功能。本研究以15日龄雄性绵羊背部皮下前体脂肪细胞为试验材料,所有的试验均设立3个重复;利用生物信息学软件预测miR-33a的靶基因,并通过双荧光素酶报告试验对预测的潜在靶基因进行验证;用qPCR和Western blotting分别检测miR-33a、Lipin1和IRS2及其编码蛋白的表达,以揭示miR-33a与其靶基因在绵羊前体脂肪细胞分化中的表达规律;慢病毒介导实现miR-33a的过表达和干扰后,检测Lipin1、IRS2和成脂标志基因的表达,并用油红O染色检测脂滴沉积能力,以解析miR-33a对其靶基因的调节机制。生物信息学分析发现,miR-33a与Lipin1和IRS23′-UTR都存在结合位点,miR-33a显著下调Lipin1和IRS2野生型双荧光质粒的相对荧光活性(P<0.05);在绵羊前体脂肪细胞分化中,miR-33a与Lipin1和IRS2的表达趋势相反;过表达miR-33a后,显著下调了Lipin1(P<0.01)和IRS2(P<0.05)及其编码蛋白以及成脂标志基因的表达;干扰miR-33a后,这些基因和蛋白的表达则显著上调;过表达miR-33a减少了脂滴沉积,干扰miR-33a促进了脂滴沉积。在绵羊前体脂肪细胞分化中,miR-33a与Lipin1和IRS2的表达呈负相关。miR-33a靶向Lipin1和IRS2的3′-UTR抑制绵羊前体脂肪细胞分化和脂滴沉积。

主 题 词:miR-33a Lipin1 IRS2 绵羊 脂肪细胞分化 

学科分类:0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

核心收录:

D O I:10.11843/j.issn.0366-6964.2020.04.006

馆 藏 号:203908927...

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