虹鳟Ⅰ型干扰素IFNa原核表达与抗病毒活性分析

作     者：杨倩 魏文燕 汪开毓 刘韬 何晟毓 谢恒 李良玉 刘家星 YANG Qian;WEIWen-yan;WANG Kai-yu;LIU Tao;HE Sheng-yu;XIE Heng;LI Liang-yu;LIU Jia-xing

作者机构：四川农业大学鱼病研究中心四川成都611130 四川农业大学动物疾病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 四川成都市农林科学院水产研究所四川成都611130 

基　　金：四川省科技厅应用基础项目(2014JY0143) 成都市农林科学院2017年“集成应用示范和科研创新”项目—现代免疫学技术在鲑鳟和鲈重要疫病防治中的研究与应用 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第42卷第1期

页      码：84-87页

摘      要：为了解重组虹鳟Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)IFNa的抗病毒效果,本研究根据NCBI中登录的虹鳟IFNa基因序列(AM489418)设计引物,PCR扩增IFNa基因,并构建重组质粒pET32a(+)-IFNa,在大肠杆菌中诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,获得的重组IFNa(rIFNa)蛋白以可溶性和包涵体两种形式表达,大小约为35 ku;重组蛋白纯化后经western blot检测,结果显示rIFNa蛋白大小符合预期;通过细胞病变抑制法检测了rIFNa蛋白的抗病毒活性,结果显示rIFNa蛋白的生物活性与其浓度呈正相关关系,抗病毒效价约为1×10~4U/mg。以上结果表明,原核表达的虹鳟rIFNa蛋白具备较好的抗病毒活性。本研究为后续研究rIFNa蛋白作为免疫增强剂抵抗病毒感染奠定了基础。

主 题 词：虹鳟 IFNa基因 原核表达 抗病毒活性检测 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.201904017

馆 藏 号：203908948...