病毒性出血败血症病毒实时荧光RT-RPA恒温检测方法的建立

作     者：陈雨 郑晓聪 温智清 贾鹏 孙洁 毛明光 田城城 黄倩君 秦智锋 刘荭 CHEN Yu;ZHENG Xiao-cong;WEN Zhi-qing;JIA Peng;SUN Jie;MAO Ming-guang;TIAN Cheng-cheng;HUANG Qian-jun;QIN Zhi-feng;LIU Hong

作者机构：大连海洋大学辽宁大连116023 深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 

基　　金：深圳市知识创新计划基础研究布局项目(JCYJ20170816143646446) 深圳海关科技项目(SZ2015203) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2020年第50卷第4期

页      码：417-422页

摘      要：为建立一种简单、快速的病毒性出血败血症病毒(VHSV)检测方法,本研究通过比较分析VHSV N基因的保守序列,设计了多对引物和一条探针。经过筛选优化,建立了实时荧光RT-RPA检测方法。该方法在39℃恒温反应20 min即可快速、特异性地检测出VHSV,与其他水生动物病毒不发生交叉反应,该方法检测限为1.83×10^3PFU/mL,利用本研究方法对30份鲑鳟鱼临床样品以及9份鱼类疫病病原样品进行检测,检测结果与荧光定量PCR方法结果一致。上述结果表明,本研究建立的检测方法操作简单,反应灵敏,结果可靠,仪器依赖性低,适用于现场对VHSV快速检测。

主 题 词：病毒性出血败血症病毒 逆转录重组酶聚合酶扩增技术 现场检测 快速检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0064

馆 藏 号：203909021...