油菜叶绿体多顺反子定点整合表达载体的构建

作     者：李文品 廖玉才 黄涛 李和平 

作者机构：华中农业大学生命科学技术学院武汉430070 华中农业大学麦类作物分子生物技术实验室武汉430070 华中农业大学植物科学技术学院武汉430070 

基　　金：科技部中德合作项目(2009DFA32330) "863"国家高技术研究发展专项(2007AA100505)共同资助 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2012年第31卷第5期

页      码：460-466页

摘      要：根据拟南芥叶绿体基因组序列设计PCR引物,从我国甘蓝型油菜栽培品种F4叶绿体基因组中克隆了长度为1.5kb的trnI和trnA2个基因序列,核酸序列分析表明它们与拟南芥基因的同源性高达94%和99%,这两个克隆的油菜叶绿体基因组序列trnI和trnA被用于构建叶绿体定点整合表达载体。利用烟草叶绿体基因强启动子Prrn和终止子TpsbA,以及筛选标记基因aadA和目的基因HSA,构建了多顺反子表达盒Prrn-aadA-HSA-TpsbA,将表达盒置于油菜叶绿体trnI和trnA序列之间,最后构建成油菜叶绿体多顺反子定点整合表达载体pIPaHTA。酶切鉴定及序列分析证实,构建的表达载体具有预期的调控元件及结构,这为后期油菜叶绿体转化体系的建立奠定了基础。

主 题 词：油菜(Brassica napus) 叶绿体 同源重组 多顺反子表达载体 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-568X.2012.05.009

馆 藏 号：203909983...