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6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建

6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建

作     者:刘莉 吴谨 侯一平 张霁 戴浩霖 廖淼 张林 陈国弟 李英碧 

作者机构:四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041 

基  金:四川省科技厅应用基础项目基金资助项目(03JY029-074-1) 纽约中华医学基金资助项目(CMB 2000-636) 

出 版 物:《中国法医学杂志》 (Chinese Journal of Forensic Medicine)

年 卷 期:2006年第21卷第5期

页      码:274-277,I0002页

摘      要:目的 为在310基因分析仪上进行6FAM—HEX—TMR—ROX四色荧光STR复合扩增分型建立基础条件。方法 以pGEM载体作为靶DNA,设计引物扩增获得500~80bp的13个长度不等DNA片段,以这些片段纯化物作为模板DNA,分别扩增获得6FAM、HEX、TMR和ROX标记的Matrix标准物,用4种Matrix标准物在310基因分析仪上构建可用于6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析的Matrix文件。结果 扩增所得的13个非标记片段,长度分别为80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,在非变性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳-银染凝胶上均表现为单条带,6FAM、HEX、TMR、ROX分别标记的片段通过310基因分析仪检测均为单峰。混合ROX标记的80、120、180、220、260、300bp的6个片段获得的内标,显示出良好的线性关系。结论 建立了有效的6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析Matrix,为进行多个STR基因座荧光标记复合扩增检测奠定了基础。

主 题 词:法医物证学 荧光分析 内标 矩阵值 

学科分类:1001[医学-基础医学] 08[工学] 0838[0838] 100105[100105] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-5728.2006.05.007

馆 藏 号:203916880...

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