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猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作     者:马红艳 蒋智勇 孙丽华 郝永清 宋长绪 MA Hong-yan;JIANG Zhi-yong;SUN Li-hua;HAO Yong-qing;SONG Chang-xu

作者机构:内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 广东省农业科学院兽医研究所广东广州510640 

基  金:国家食品安全重大专项(2001BA804A31) 广东省农业科技攻关项目(2003B21404 20052490100) 广东省自然基金项目(04002083 031990) 广东省自然基金重点项目(06105311) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2007年第37卷第8期

页      码:666-669页

摘      要:根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%。将ORF1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-ORF1。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,PCV1ORF1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku。

主 题 词:PCV1ORF1 克隆 表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1673-4696.2007.08.007

馆 藏 号:203917112...

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